1 标准品配制
(1) 标准储备液0.25 mg/mL:称取地克珠利、托曲珠利砜对照品各25 mg,精密称定,用N,N-二甲基甲酰胺50 mL溶解,加乙腈稀释并定容至100 mL容量瓶中,配制成浓度为0.25
mg/mL的标准储备液。
(2) 标准工作液100 ug/mL:准确量取标准储备液4 mL,用乙腈稀释并定容至10 mL容量瓶中,配制成浓度为100 ug/mL的标准工作液。
(3) 标准工作液10 ug/mL:准确量取标准储备液0.4 mL,用乙腈稀释并定容至10 mL容量瓶中,配制成浓度为10 ug/mL的标准工作液。
2 提取
称取试料(5±0.05) g,置于50 mL离心管中,加入1颗陶瓷均质子(Cat#1103),加入无水硫酸钠5 g,乙腈10 mL,涡旋混匀(脂肪、家禽皮+脂置50 ℃水浴加热5 min融化后涡旋混
匀),中速振荡10 min,6000 rpm离心5 min,取上清液移至另一新的离心管中,加正己烷30 mL,振摇1 min,6000 rpm离心5 min,分离乙腈层。残余物再按上述步骤重复提取一
次,乙腈层经同一份正己烷分配,振摇1 min,6000 rpm离心5 min,分层,合并乙腈层于60℃氮吹至近干,残渣加入95%乙腈溶液5 mL,涡旋混匀,为待净化液。
3 净化
ProElut AL-B 2g/12 mL(Cat#65207)
(1)活 化: | 加入10 mL95%乙腈水溶液,弃去流出液; |
(2)上 样: | 将待净化液加入柱中,弃去流出液; |
(3)淋 洗: | 加入3 mL95%乙腈水溶液,弃去流出液; |
(4)洗 脱: | 加入7 mL80%乙腈水溶液,收集洗脱液; |
(5)重新溶解: | 将洗脱液在60 ℃下氮气吹至干,用乙腈-0.3%乙酸水溶液定容至1 mL,涡旋混匀1 min,超声2 min,混匀后过0.45 um 尼龙膜(Cat#37180),上机分析。 |